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原則:用 sep柱不同填料中測(cè)定的化合物與背景雜質(zhì)的分配系數(shù)差異,匹配相應(yīng)的洗脫溶劑,將化合物與雜質(zhì)分離。
分類:反相萃取柱(從極性基質(zhì)中提取非極性樣品),正相萃取柱(從極性基質(zhì)中提取極性樣品),離子交換萃取柱(從電荷樣品中提取)。
應(yīng)用:它主要用于反相萃取,適用于非極性到中極性化合物,如素、、酞-、、、染料、芳香香油、脂溶性-、殺-劑、除草劑、環(huán)境、 pah和 pcb殘留物、食品添加劑、碳水化合物、對(duì)-甲取代脂、酚類、酚類、-二-酯、類固醇、表活化劑、、水溶性-等。
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phenyl-柱:與c18和c8相比,吸附較弱,邢臺(tái)石墨化炭黑spe柱,適用于非極性化合物到中極性化合物,-是-系化合物。cyano-cn-基柱
反相萃。哼m于中極性化合物,正相萃。哼m于,物質(zhì),染料,除草劑,類固醇;弱陽(yáng)離子交換萃。哼m于碳水化合物,陽(yáng)離子化合物…
-阿米諾-nh2:正相抽提:適用于極性化合物,弱陰離子交換抽提:適用于碳水化合物,弱陰離子及有機(jī)酸化合物。
aluminaa型酸性氧化鋁柱,
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gp-c18通用反相色譜柱特點(diǎn):
利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)
*柱間重現(xiàn)率高
*選擇性和分離效1率高
適宜于分離酸性1、中1性和堿性化合物,以及多種藥1物和多肽等
建議使用有機(jī)溶1劑或有機(jī)溶1劑/水系統(tǒng)的流動(dòng)相。
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無(wú)縫gp-c1用時(shí)比反相色譜柱特
預(yù)埋用容易高可控性的單分子成樣品技術(shù)和封尾
整體*柱間重現(xiàn)
ptfe (聚四氟,特氟龍)
·建議采用單一進(jìn)樣;
·在質(zhì)譜分析中較合適;
優(yōu)良的溶劑耐受能力和化學(xué)相容性;
打孔之后不能重封;
·不建議長(zhǎng)期存放樣品。
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對(duì)正相體系,先對(duì)目標(biāo)化合物的正-溶液進(jìn)行上樣,然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正-溶液對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行洗脫,分別收集洗脫液的分析結(jié)果,建立淋洗曲線,確定目標(biāo)化合物洗脫后的溶劑體系,淋洗后的甲1基-1醚含量應(yīng)略低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時(shí)的溶劑體系,而洗脫液中甲1基-1醚的含量應(yīng)略高于目標(biāo)化合物正好被洗脫時(shí)的溶劑體系。
合理處理 spe柱,在 spe柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中,活化溶液應(yīng)選擇整個(gè)洗脫過(guò)程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系。
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樣本制備問(wèn)題
大部分流速問(wèn)題是由于樣品制備不當(dāng)造成的。例如樣品混濁、離心過(guò)濾不充分造成上樣時(shí)篩板堵塞,或樣品本身的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)處理不當(dāng),造成有效蛋白沉降,造成篩板堵塞。通過(guò)改進(jìn)前處理方法,可解決由這種原因引起的流速問(wèn)題。因此,樣品準(zhǔn)備是- spe正常流動(dòng)速度的di一步。
小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)
充填粒徑的作用,大充填粒徑的充填越疏松,石墨化炭黑spe柱批發(fā),流動(dòng)相阻力越小,流速越快;小充填粒徑的作用,石墨化炭黑spe柱品牌,充填越緊,流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um,石墨化炭黑spe柱規(guī)格,農(nóng)殘級(jí)弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um,大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會(huì)比一般小柱要快,-是大孔硅藻土小柱,在使用時(shí)需要配以導(dǎo)流針來(lái)控制流速。
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